在色譜鑒別試驗(yàn)中，利用對(duì)照品對(duì)色潛分離物進(jìn)行鑒別是最常用的色譜定性方法。其原理基于相同的化臺(tái)物在相同的色譜條件(流動(dòng)相組成、色譜柱和柱溫等)下，具有完全相同的特定色

譜保留行為。通常在相同的色譜條件下，如果被測化臺(tái)物和對(duì)照品具確相同的保留值，就可以初步認(rèn)為，被測化臺(tái)物與對(duì)照品為相同物質(zhì)。藥典等藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的色譜鑒別法都足以此為依據(jù)的。宴際測定中，應(yīng)首先分別測定對(duì)照品和供試品的色譜保留時(shí)間。宴踐中可能會(huì)遇到多種情況，現(xiàn)舉例分別介紹如下：

     注意：當(dāng)實(shí)驗(yàn)中初步發(fā)現(xiàn)供試品和對(duì)照品的保留時(shí)間略冉不同時(shí)．首先應(yīng)確定這種差異不是由于供試品和對(duì)照品的組成、濃度等的差異所致。簡單的排除方法是將供試品和對(duì)照品等比例混合進(jìn)樣，觀察在相同色譜條件下是否能分離出兩個(gè)色譜峰。如確有兩個(gè)色譜峰出現(xiàn)，則可吼肯定供試品和對(duì)照品的保留時(shí)間不同，反之，不能肯定兩者的保留時(shí)間不同。

  嚴(yán)格地說，根據(jù)某一特定色譜條件下供試品和對(duì)照品的保留時(shí)間相同．就判斷兩者為相同物質(zhì)仍具有一定的風(fēng)險(xiǎn)性。如需要進(jìn)一步確定供試品和對(duì)照品相同，應(yīng)根據(jù)對(duì)照品的特性，選擇不同的色

譜條件(通常選掙不同的流動(dòng)相)，進(jìn)一步比較供試品和對(duì)照品在不同色譜條件下保留值的變化是否相同。如對(duì)有機(jī)酸堿化合物，應(yīng)比較流動(dòng)相pH值在其曲左右變化時(shí)保留值的變化；對(duì)非極性化舍物．應(yīng)比較其保留值隨流動(dòng)耜強(qiáng)溶劑改變的變化規(guī)律。如果多次改變流動(dòng)相的組成，供試品和對(duì)照品的保留值均完全一致，則可進(jìn)一步肯定供試品和對(duì)照品為相同物質(zhì)。